第117章 那啥?我有点事先走一步(求订
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方子业先开吃,也就先吃完午饭。
吃完后就站起身,往垃楼梯口的垃圾桶里,把饭盒一扔,用指纹打开了实验室的门。
这会儿,洛听竹不知道从哪个学科的实验室请来的刘师兄正在刷着手机,属于是实力高超的云淡风轻,看到有人开门,他抬头望来,与方子业抿嘴一笑,算是打了个招呼。
方子业不认识他,至少不是骨科的师兄,所以方子业也并未上前去说些什么。
洛听竹找人问问题,自然是没毛病的。
这位师兄,勇敢而直接的主动,也没什么毛病。
只要他没有什么坏心思,起什么歪门邪道的鬼主意,方子业站不到任何的角度去干涉些什么,还是做好自己的事情。
自然,洛听竹希望方子业可以小小的露一手,从她的角度,希望以后这位刘师兄不要来麻烦她,这一点,方子业也是不可能答应的,也不可能去主动挑衅,做好自己。
否则万一遇到了铁板,到时候把自己变成了小丑,岂不是贻笑大方?
默默地做好自己的事情,展现出来一定的能力。
要来骨科实验室里帮忙做实验,实验室里是欢迎的,不过要说耀武扬威的话,那还是不至于的。
他就算是再能打,要是把袁威宏或者秦葛罗叫来,他也只能灰溜溜回去。
自然,可能邓勇教授在基础实验方面的实操,可能不怎么好,但是还有洪字礼副教授啊!
洪字礼副教授的科研底蕴,与手外科的刘煌龙教授,无法直接对比,但是在洪字礼副教授所在的专科领域,目前是学术巨擘级别,比刘煌龙还要牛掰,只是说专业能力没那么强而已,属于是中南医院外科学领域科研中的绝对顶牛。
就算邓勇教授这样的正高教授可以没有学生,洪字礼副教授不能没有硕士和博士研究生,这是邓勇教授自己所说的原话。
方子业要用细胞操作台,洛听竹也同样要用。
而且,洛听竹的细胞操作台,还是方子业给她预约的,时间只是比方子业晚了十几分钟。
细胞操作室里面的操作台共有三个。
方子业全副武装地走进去,把自己比洛听竹更前预热的培养基、PBS缓冲液拿出,然后还有可加热的试剂以及不可加热的试剂,都一一用酒精消毒喷洒后,放进了操作台中。
等洛听竹带着刘师兄进来到实验室里的时候,方子业已经是开始操作了。
操作台内的酒精灯一点,排气扇一开,把细胞操作台的玻璃往下一拿,方子业就开始对培养瓶里面的细胞进行胰酶消化。
胰酶消化,是很多操作都必须要经过的一步。
细胞在培养瓶内时,是贴壁而生,需要消化后,将细胞悬浮起来,如此才能够离心将细胞与试剂分离,然后进行传代、分装,转移到培养皿以及培养板中,相当于是一个过程性的操作。
这一个操作,可以类比为你从你常住地出家门口这一步,不管你下楼吃饭、下楼买水果,或者是做其他的事情,伱首先得从门口跨出去。
这一步,是很简单的,没有太多的操作性可言,主要的功劳,都是离心机的。
方子业抽去胰酶悬浮液,避免过度消化把细胞给弄死了。
因为贴壁生长的细胞,就相当于是在寝室里熟睡的小学生,胰酶相对于给寝室里扔一颗烟雾弹。
但烟雾弹只是让他们出寝室这个门,而不是把他们关在里面给熏死了。
然而,等到方子业把分离好的细胞群都完全悬浮起来,重新进行了配比之后。
方子业就赶紧先把悬浮的细胞进行一次计数处理。
细胞的计数操作,暂时不在细胞房里,得去匀一点试剂,去跑一下流式细胞仪,把浓度确定好。
同一批样品内的细胞浓度,可以等同。
就好比你喝一瓶饮料,第一口和最后一口,原理上应该是甜度或者味道是对等的。
可计数完后,方子业并未把样品带回,而是在那边,就直接封闭丢进了生物垃圾袋里。
但知道了浓度之后,方子业的操作就开始了。
稀释样品,其实原理很简单,就是把1ml的样品,加入99ml的水,然后就稀释了一百倍,而如果是把1ml的样品,加入到999ml的液体里面,就是稀释了一千倍。
而在进行浓度梯度的实验时,就需要重复操作这么一次,一般每次是稀释10倍数。
按照正常的操作,其实只需要提前把液体量配好。9ml、99ml、999ml。
然后再加入1ml的细胞悬浮液进去,然后分别配匀后,再抽取9ml+1ml中的1ml,转移到99ml中即可。
最多就是换几个移液枪头的事情。
但今天的方子业,却不是这么操作的。
他是把移液器,调到了200uL后,再直接往下面挤出来1ul、10ul以及100ul的量,到培养皿中。
没有调节刻度,也没有更换移液器。
这种操作,绝对是袁见打的操作。
毕竟啊,这相当于是盲操了啊,你要在200ul的移液器下,非定量地挤出来1ul的液体量,这不是扯犊子么?
可方子业还就是这么做的。
自然,这些稍微细节性的问题,旁边正在操作的刘师兄和洛听竹二人,都没看到,就看到方子业的移液器枪头都没有更换,就这么如同小鸡啄米一般地点点点,点点点。
点了有一阵后,方子业再把不同的样品,都分别再加了999、990、900ul等位基数的纯粹培养基液体。
然后才再增加几根试管,重新用最标准化的操作,继续稀释细胞浓度。
这一次,方子业是为了寻找最佳操作的细胞浓度数量级,最后选择一个最合适的浓度进行试验。
毕竟,目前方子业在做的这个miRNA与骨巨细胞瘤中的HK2的关系,是没有其他人做过的,方子业参考了其他肿瘤细胞与HK2关系的最佳浓度,没能够得到最好的图片,方子业就只能是自己再去找了。
一切都是未知数,甚至连参数都是未知数,这就是一些基础实验的难度。
但耗费不贵,只是费了时间而已……
方子业这么操作了几次后,就先把一个二十四孔的细胞培养板盒盖上,然后送进了恒温细胞培养箱里。
方子业的下一步操作,则是处理另外一个骨巨细胞瘤细胞系的这种浓度梯度差。
因为有可能不同细胞系的最佳反应浓度,还是不一样。这就好像是临床上,同样是骨巨细胞瘤,但因为分型不一样,所以术前术后的新辅助化疗方案也会有所不同。
都是摸索而来的。
方子业所做的这些实验,想要对标发表的不是什么普通期刊,至少是15分以上的高质量期刊,自然要做好最全、最足的准备。
且,找到了数量级后,方子业还得寻找1-9这个最佳反应的前置参数,看看同样的数量级下,是否有差异。
而一般走到了1-9最佳参数,再加上数量级的最优解后,就不必再找。
方子业操作的骨巨细胞瘤细胞系,包括GCT-0404、GCT1、GCTSC。(注解:这些细胞株纯属原创,请专业知情的书友勿与现实对应。)
方子业走之后,洛听竹围观的刘师兄才若有所思地看向了洛听竹,好奇问:“洛师妹,这个是你师兄还是你师弟啊?做实验操作都是这么虎的啊?”
“我看他刚刚好像是打算做标准曲线的操作,直接盲操啊?”
方子业的操作,在不懂的人眼里,就不过是加点东西而已,但是在做细胞实验的专业研究人员眼里,你这都是啥啊?
要是被你老师看到了,能把你的皮都给扒拉下来。
能有标准的操作路线你不做,你非得给自己整点难度出来。
不过,根据经验,一般来说,1ml水是20滴至25滴,所以一滴水就是0.04至0.05ml.若是用一般的滴管滴,则大约为0.05ml,若是用滴定管滴,则大约为0.04ml。
“老刘”自己没算过用100ul口的移液枪头滴一滴出来,大概是多少ul,但是,反正自己的学生,要是敢这么操作。他不说一巴掌招呼上去,绝对能骂得对方自闭两三天,滚出实验室里好好反省一下。
“哦,方师兄啊?不知道。”洛听竹内心窃笑,表情正经着。
“方师兄的操作熟练度比我好多了,以前和方师兄学习的时候,他都是按部就班地操作着的,但最近不太知道。”
刘师兄也就没再多说什么,在做完细胞分装的过程后,他便带着洛听竹再做miRNA沉默细胞株的构建。
这需要一定时间的等待过程。
略显无聊。
也或许是洛听竹在刘师兄的耳旁,唠叨过一阵子,所以刘师兄有点好奇,这个方子业到底是个什么鬼,刚刚愣是让他没看懂。
于是,他在与洛听竹出来后,便问:“师妹,你可以带我随便转转吗?我还没来过你们骨科的实验室呢。”
刘师兄见着实验室里的规模不算特别大,比起他所在的泌尿外科的实验室,还要稍微小一点,便如此提议。
洛听竹没拒绝,来者是客,不管是厚着脸皮来的,还是怎么来的,只要不是强来,就得做好一定接待工作。
刘师兄属于是实验室外人员,是她带进来的,就不能让他随便走,她得跟着。
刘师兄并未追着方子业去看,而是走走看看,看看能不能遇到自己的熟人,可没想到的是啊,刘师兄还真的遇到了一个熟人,算起来是他的同学,目前是胸外科的博士研究生。
叫钱乔峰,外号帮主。
钱乔峰个子高瘦,面相清秀,也戴着一个眼镜,出门时正好与刘师兄和洛听竹撞见。
看着洛听竹背着手跟在刘师兄旁边,仿佛是懂了什么似的:“远哥,你这是来啊视察?还是来拜访啊?”
刘腾远,是刘师兄的名字。
“帮主,你?你是在这里的实验室啊?”刘腾远看到钱乔峰的一刻,心情立刻一紧。
钱乔峰是胸外科的博士研究生,是专业型的研究生,但是做实验也非常厉害,目前在他们这一届的博士生里面,钱乔峰是国奖的常青藤。
要拿国奖,可不是专业内评比,是内外妇儿皮肤精卫等所有的医学生,都拉起来评比,靠近前百分之十的,才有机会拿到国家级奖学金,基本上每年都需要不少的产出。
“嗯,我师父是在这里做实验的!”
“听竹,是你介绍一下,还是我让远哥介绍一下。”钱乔峰把手里捧着的装着实验器械和试剂的托盘往旁边一放,就聊了起来。
洛听竹赶紧解释:“钱师兄,这是刘师兄,过来帮我做实验的。他想参观一下我们实验室。”
钱乔峰的眼神稍稍收敛,看向刘腾远的目光带着沉思。
刘腾远在看到钱乔峰的时候,目光就稍微有点怂了。这TM,怎么刚好闯进来的实验室竟然是胸外科科研大拿洪字礼团队的实验室啊,这不是一头扎到了铁板上么?
刘腾远赶紧解释:“帮主,你这不厚道啊,你师妹有困难,你都不帮忙的,还得大老远地从楼下叫我。”
“你TM就不能少看点漫画和动漫嘛?”
钱乔峰侧身顶着托盘:“我看个鬼,我都有两个星期没追番了,还看动漫。”
“忙得要死……”
这么一来二去,洛听竹倒是解脱了,钱乔峰和刘腾远是同学,既然刘腾远想看,钱乔峰倒是不好驳面子,亲自带着刘腾远就转了起来。
刘腾远心里则是暗暗叫苦的同时,暗恨这个钱乔峰简直不厚道,或者是不讲人情,我这需要的是你带我转一转吗?
但是,等过了一会儿,钱乔峰慢慢给刘腾远介绍了一些他的师兄和师弟后啊,刘腾远的神色才渐渐严肃和平静起来。
“我靠,这实验室里的设备,够可以啊,比起一般的省级重点实验室,好像还要更全面一些,这细胞储存冰箱,竟然有这么多个?”刘腾远在细胞冻存房门口,啧啧称奇。
“还好吧,临时放一下是足够的,但是有时候,还是不太够用,实验室里的人不少,东西太多了。”
“你看,就这个柜子,是我师兄的,一个人占了整一半,十多种不同的细胞系……”
“还有这个……”
刘腾远则点了点头:“洪教授还是厉害,今年可以升教授么?”
“估计难,我老师把大部分的时间都专精在了科研上,主任医师这一步没过得去,今年如果可以升主任医师的话,就可以升教授。”钱乔峰就这般解释着。
然后,两人又走到了一个操作室,钱乔峰立刻停顿了一下:“这个,是骨科创伤外科邓教授的学生,我们的师弟,简直猛得雅匹!”
“基础实验操作,比我的师兄还要成熟一丢丢。”
“喏,你看,你觉得他目前进行的所有操作,成功率目前是多少吗?”
“成功率率百分之八十?”刘腾远说了个比较夸张的数字。
很多人,做实验都是可能一次得不到结果,需要重复两次甚至三次,不断调整的。
“目前保持在百分之九十八,大大小小至少做了五十多个小操作,目前只重复了一次,这个百分之九十八,还是十几天之前计算的。”
“老牛逼了,我师兄都说,等他毕业之后,以后我要是什么实验拿不下,就可以找他帮忙。”
“喏,那个,也是骨科的,董文强,我们一届的,学术型博士,你可能接触得不多咯。”
“他是个比较孤僻的人,本来可以拿国奖的,懒得参与,家里不缺这点钱,只想老实本分的工作。发表的文章比我还多,六分以上的article博士期间就发了两篇,目前估计还有一篇,在往外面投。”
“这个是……”钱乔峰如数家珍。
带着大概走了一圈,刘腾远收敛起了害臊的心情,赶紧回到了洛听竹那边。
也不好马上走,都答应了帮洛听竹把实验做完,也只能硬着头皮做啊。
然而,等到了他处理完了细胞系的细胞株的操作后啊,刘腾远就赶紧说:“那啥,师妹,这边的操作也差不多了,师兄我还有点事,我就先走了啊。”
“谢谢师兄,下次如果师兄要做实验帮忙的话,可以叫我。”洛听竹忙起身跟了一截,彬彬有礼地说。
以前啊,她可能还会说要不要请客吃个饭的,但现在,她都不会请师兄们吃饭了。因为这种饭不好吃,自己给不出去钱,反倒还欠下人情,并不值当。
刘腾远于是就赶紧背着自己的阿玛尼背包走了,也没敢再多停留。
不过,洛听竹在刘腾远的背包字眼上停留了几次,便抿了抿嘴,转身而去,在转身的时候,洛听竹还在低声喃喃。
“爸爸说,谈朋友的时候,家庭条件太好的人不要找,找差不多的比较合适。最好是找家境有零花钱卡上余额十倍到二十倍的,太高不易真心,太少则生活难行。”
“一般人,舍得不眨眼买的包,可能是所有家底的千分之一到万分之一之间。年轻人可能更闹眼一点……”
“但这张卡上有八十五万,这也好像不太好找啊。”
“算了,不管了……”洛听竹快步走向细胞房里,抓紧时间去拍照。
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